經(jīng)典的簡(jiǎn)易凝膠滲透色譜柱大多采用玻璃管作為柱管材料,一般玻璃柱管耐壓是3000~4000kPa,不能承受更高的壓力,無(wú)法滿(mǎn)足凝膠滲透色譜柱的需要。
而不銹鋼柱管的耐壓可達(dá)幾萬(wàn)kPa,甚至更高,所以玻璃柱管逐漸被不銹鋼柱管取代。目前,GPC所用的柱子大部分采用不銹鋼柱管,根據(jù)不同的色譜分離條件,來(lái)選擇合適填料規(guī)格的色譜柱。
那么凝膠滲透色譜柱該如何進(jìn)行選擇呢?下面一起來(lái)看看吧
目前隨著GPC技術(shù)的不斷發(fā)展和更新?lián)Q代,在一般的凝膠滲透色譜儀中,凝膠滲透色譜柱的長(zhǎng)度多在150~600mm之間,柱內(nèi)徑約為2.1~30mm。過(guò)分長(zhǎng)和粗的色譜柱在裝柱過(guò)程中,對(duì)裝柱技術(shù)的要求更高,想要裝出既均勻又緊密而達(dá)到高效的色譜柱,難度較高。
實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常選用2~5根甚至更多根色譜柱串聯(lián)起來(lái)使用,也可將同一型號(hào)的2根或2根以上的色譜柱串聯(lián)使用,這樣可以增加柱容量,擴(kuò)展色譜柱的線性分離范圍,得到高的分離效率。
比如技術(shù)人員為了要增加對(duì)低分子量部分的分離效率,可以通過(guò)增加裝有小孔徑凝膠的色譜柱數(shù)量來(lái)達(dá)到分離低分子量物質(zhì)的目的。
實(shí)驗(yàn)要求凝膠滲透色譜柱的柱管內(nèi)表面必須光滑平直,這樣流動(dòng)相在色譜柱內(nèi)就不會(huì)形成溝流或死域,也就是說(shuō)在該區(qū)域內(nèi),流動(dòng)相可能停滯不前或因溝流使流速比柱中其他部分快,這些都會(huì)影響色譜柱的分離效率。
凝膠滲透色譜柱內(nèi)徑的大小也是影響分離效率的一個(gè)因素,初期的GPC經(jīng)常使用2~5cm內(nèi)徑的粗柱,由于GPC技術(shù)發(fā)展不夠成熟,導(dǎo)致分離效率低。
現(xiàn)在高效GPC通常使用2.1~8mm內(nèi)徑的不銹鋼色譜柱。在制備型GPC儀中,所用的柱內(nèi)徑較大,一般在10~30mm之間。